8ª Asamblea Internacional HHT2009

Sesiones completamente científicas

Sesión I: Malformaciones Arteriovenosas en modelos animales. Angiogénesis y desarrollo vascular

Moderadores: Helen Arthur (Newcastle, Inglaterra) and Michelle Letarte (Toronto, Canadá)

Los modelos animales de HHT en ratón se consiguieron en el año 1999 y 2000. Muestrando que el ratón HHT (heterozigoto, un gen normal y uno mutado) presenta lesiones (epistaxis, telangiectasias) en un 30% de los animales y sólo un 1% de malformaciones arteriovenosas internas. El mutante completo en homocigosis (dos alelosmutados, no llega a nacer, por tanto la mutación, tanto en ALK1 como en ENG es letal)

 Ratones heterozigotos homozigotos   100% de los embriones  
                                                       mueren por fallo de vascularización 

Arthur y col Dev Biol,2000

Helen Arthur, de Newcastle, Inglaterra, presenta ahora resultados más sofisticados con mutantes inducidos en determinados tejidos del ratón : retina, piel. Se presentan resultados, para endoglina.

Mientras que en piel las mutaciones inducidas en adulto, no dan lugar a  alteraciones vasculares aparentes, en retina sí que hay un retraso en la progresión de las redes capilares, y una muscularización de las malformaciones arterio-venosas, es decir, aumenta el número de células y el  número de divisiones celulares. Es paradójico que hay defectos en angiogenesis de las retinas, pero también hay una proliferación aumentada del endotelio.

 Paul S. Oh, de la Universidad de Florida, USA, presenta el modelo de mutante completo de ALK1inducido en células de vasculatura (endoteliales) de cerebro en embriones. Los ratones mueren a los 5 dias después del nacimiento. Cuando la mutación completa de ALK1 se induce en ratones adultos, se produce letalidad debida a hemorragias en pulmones, tracto gastrointestinal, útero y placas de  Peyer. La ablación del gen ALK1 en piel adulta produce una gran cantidad de conexiones arteriovenosas (shunts).

 Beth Roman, de la Universidad de Pennsylvania, USA , muestra la mutación equivalente a ALK1, en el pez cebra, (zebra fish). Este gen es vbg, las arterias y venas aumentan de calibre y se forman conexiones directas entre arterias y venas (shunts). La formación de estos shunts requiere flujo sanguíneo. En ausencia flujo no aparecen shunts.
Influencia del ambiente en las lesiones vasculares: heridas, inflamación, angiogénesis activa, estrés mecánico, flujo sanguíneo (“shear stress”)

Sesión III: Implicaciones moleculares y celulares en HHT 
Moderadores: Mirjana Jerkic (Toronto, Canada) and Maria-Jose Goumas (Leiden, Holanda)

Los monocitos, de la sangre de ratones HHT1, tienen disminuída su capacidad de integrarse en la vasculatura cerca de zonas infartadas en mode-los de infarto en ratón. La explicación de esta discapacidad reside en el fallo del eje, CXCR4-SDF1-CD26. CXCR 4 es el receptor de SDF-1, que es una citoquina (producto celular) que actúa de sustancia quimio-atractactiva para los monocitos. CD26 es un receptor que interfiere con la unión SDF-1/CXCR4. En monocitos HHT1 hay un exceso de expresión de CD26 que actúa negativamente sobre la atracción que ejerce SDF-1 sobre los mismos. Como resultado, los monocitos no se —pegan“ a la vasculatura de las zonas afectadas por infarto. Si se contrarresta el efecto del exceso de CD26 con diprotina A, se restaura la capacidad de integración de los monocitos a la zona infartada, proceso que contribuye a la recuperación post-infarto.

  Evidencias de influencia de la HHT en el sistema inmune

1. La presentación del grupo de Lyon (Malcus, Sophie Dupuis-Girod y Henri Plauchu muestra un estudio de 42 pacientes de HH, tanto HHT1 como HHT2, analizando los niveles de inmunoglobulinas del suero,así como el número de linfocitos activos CD3, CD4 y CD8, que intervienen en respuesta inmune. Sus estudios demuestran una ´deficiente respuesta inmune adaptativa, que puede explicar la frecuente presencia de infecciones bacterianas recurrentes en los pacientes de HHT

 
2. La contribución del grupo español(CIB de Madrid) en este punto ha sido clara: Maria Luisa Ojeda y col. presentan un poster sobre la existencia de más de 200 genes con expresión disminuída en los macrófagos de pacientes de HHT en relación a macrófagos de voluntarios no HHT. Estos genes, están siendo validados a nivel de expresión de ARN y de proteína y funcionalmente se relacionan con el sistema inmune, con la respuesta frente a infecciones bacterianas y virales, con la respuesta frente al estrés oxidativo, y frente a inflamación.

3. Papel de la expresión de endoglina en la progresión tumoral, presentado por el Dr. Pérez Gomez, del grupo de Miguel Quintanilla del IIB de Madrid. La disminución de endoglina produce menos frecuencia de tumores de piel inducidos en ratones, pero los tumores que progresan son más agresivos.

4. La isoforma corta de Endoglina se expresa más en células senescentes (viejas). Presentación realizada por el doctor Blanco, del CIB de Madrid.

5. Presentación del grupo del CIB, de HHT, de Madrid, en busca de nuevos marcadores en sangre relacionados con el diagnóstico de HHT Trabajo presentado por Luisa M Botella, y col, que demuestra que los niveles de endoglina soluble, Receptor soluble (sFlt) de VEGF (factor de crecimiento de la vasculatura) y de la angiopoietina 2, están disminuídos en pacientes de HHT1 y 2, pudiendo usarse como marcadores diagnósticos de la enfermedad. Este método ha sido patentado en Octubre del 2008.

Sesión XI: Endoglina, ALK1 and Smad4 en las vías de señalización de TGF-beta and BMP

Moderadores: Gerard Blode (Carolina N, USA) and Sabine Bailly (Grenoble, Francia)

BMP9 es una molécula que se une a ALK1, con más afinidad que TGFbeta. Ambos compuestos señalan a través de ALK1/Endoglina en las células endoteliales. Estos trabajos han sido presentados por el grupo de Sabine Bailly, de Grenoble, que publicaron por primera vez hace 2 años que BMP9 era un ligando más natural y específico de ALK1, que TGFbeta. Ahora ellos describen que BMP9 circula en sangre en concentraciones elevadas, 2ng/ml, y que hay efectos contrarios entre TGFbeta y BMP-9. Mientras que TGFbeta produce motilidad en células endoteliales, BMP-9 induce quiescencia.

El grupo de Gerard Blobe describe una enzima, kinasa, CK2beta,que se une a ALK1, y activa su via de señalización.

Eva Garrido, del CIB de Madrid, presenta un poster sobre la caracterización del promotor de ALK1. El promotor es la región reguladora del gen, que no estaba estudiada en detalle en ALK1. En este trabajo Eva describe los inicios de transcripción, la necesidad de Sp1 para que ALK1 inicie la transcripción, y la cooperación funcional entre Sp1 y KLF6 en procesos de heridas vasculares en el laboratorio, de manera que tras una herida, la expresión de ALK1 aumentaría mediada por KLF6